Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это высокоточный метод, который может использоваться для молекулярно-генетической диагностики разнообразных инфекций. Анализ ПЦР позволяет определять возбудителей инфекционных заболеваний в различном биоматериале, на основе универсальности их генетического материала (РНК или ДНК).
ПЦР в 1983 году разработал Кэри Мюллис (США), за что в 1993 году он был удостоен Нобелевской премии в области химии.
Мазок со слизистой рта и носоглотки или кровь позволяют диагностировать даже бессимптомное течение болезни, посмотреть, насколько эффективное лечение и подтвердить выздоровление.
В ходе исследования пробирку с выделенными образцами нуклеиновых кислот помещают в особые условия, под воздействием которых молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующие генетическую информацию определённого возбудителя инфекции, многократно копируются. Если в исследуемом образце было хотя бы небольшое количество частиц возбудителя, то через несколько часов их число увеличится до десятков и даже сотен миллионов. Это позволяет легко обнаружить возбудителя инфекции в приборе при очень низких рисках ложноотрицательного результата.
К сожалению, ни один лабораторный анализ не обеспечивает абсолютной точности, всегда есть вероятность ошибки. Причем ошибиться анализ может в обе стороны: либо не найти генетического материала возбудителя, когда он есть (ложноотрицательный результат), либо обнаружить его у человека, болеющего чем-то другим или вовсе здорового (ложноположительный результат).
Однако в случае ПЦР чаще встречаются ложноотрицательные результаты, прежде всего связанные с нарушением методики проведения анализа. Особенностью метода является необходимость в высокотехнологичном оборудовании и высококвалифицированных специалистах.
Получение ложноположительного результата может быть обусловлено лишь «человеческим фактором» (например, загрязнение отрицательной пробы положительным образцом, неправильная маркировка пробирок или неадекватно обработанный результат анализа).
Метод ПЦР - точнее не придумали
Какой биоматериал берут для диагностики инфекций?
Универсальность. ПЦР дает возможность определить многие из известных на сегодняшний день микроорганизмов, вне зависимости от вида исследуемого биоматериала.
Специфичность. ПЦР позволяет определить нуклеиновую кислоту вируса или бактерии с точностью, близкой к 95-98%, что не дает ни один другой способ диагностики.
Чувствительность – даже один мельчайший «обломок» ДНК или РНК может быть обнаружен и идентифицирован благодаря быстрой реакции образования ее копий.
Оперативность – поставить диагноз на основании ПЦР можно уже через несколько часов после забора биоматериала, что дает возможность своевременно приступить к лечению заболевания.
Возможность проведения количественного анализа. Эта особенность важна в тех случаях, когда имеет значение количество выявленных микроорганизмов, поскольку повышенное содержание в организме определённых микроорганизмов вызывает заболевание, а нормальное количество является абсолютно благоприятным для организма.
Взятие биоматериала осуществляется натощак или не ранее, чем через 2 часа после приема пищи и питья. До полоскания, орошений лекарственными средствами.
Исследование рекомендуется проводить до начала противовирусного или антибактериального лечения.
За 24 часа до взятия биоматериала не рекомендуется применение всех видов местных форм лекарственных препаратов.
За 3 часа до взятия биоматериала не рекомендуется употреблять пищу, пить, полоскать рот, чистить зубы, курить.